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瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)步驟

(1)安裝電泳管選擇聚含均勻、無氣泡、無裂縫、膠面平整并與管壁沒有脫離現(xiàn)象的合格凝膠電泳管插入上電極槽底板的各圓孔中，留1/5在底板上方，保證使電泳管與底板垂直，密封處不致滲漏。(2)加樣可利用上述方法制成樣品膠，也可以用如下的一種方法加樣。將樣品溶于200mg/ml濃度的蔗糖溶液中，或溶在10%甘油中，然后加在濃縮膠的表面。或?qū)⑷刍沫傊c樣品溶液混合后加在濃縮膠表面。或用與電泳管內(nèi)徑相近的圓形厚濾紙片，將樣品溶液吸收后，緊貼在濃縮膠表面。如樣品是固體，應(yīng)先溶在濃縮膠緩沖液...

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瓊脂糖凝膠電泳影響凝膠聚合的因素有哪些

對(duì)于一般的分析工作，特別是定量分析工作來講，人們強(qiáng)調(diào)制備的凝膠要有很好的可重復(fù)性。如果制備得到的凝膠本身沒有重復(fù)性，比如孔徑前后兩次凝膠相差頗大，那么在這樣的條件下，所得到的分析結(jié)果，其可信性就有問題，往往會(huì)使幾次結(jié)果不能重復(fù)。所以，為了要獲得可靠的分析結(jié)果，在制膠時(shí)對(duì)能影響凝膠聚合的種種因素必須加以控制。有哪些主要因素，又怎樣來控制它們的條件，分別簡述如下：(1)制備凝膠用的主要試劑丙烯酰胺、甲叉雙丙烯酰胺至少是分析純級(jí)的試劑。存放時(shí)間一般不超過1年,如果存放時(shí)間過長，丙烯...

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原生質(zhì)體葉肉細(xì)胞瞬時(shí)表達(dá)實(shí)驗(yàn)步驟

原生質(zhì)體葉肉細(xì)胞瞬時(shí)表達(dá)實(shí)驗(yàn)步驟1、生長培養(yǎng)好的試驗(yàn)材料（一般為生長20天左右的擬南芥幼苗葉片）2、在擬南芥開花前取樣（30片葉子左右即可）3、切取葉片為0.5-1mm的細(xì)條（如果材料能達(dá)到每克107個(gè)原生質(zhì)體，10-20片葉子需要5-10mL酶解液）4、迅速將切下的樣品轉(zhuǎn)到酶解液中，要求全浸沒。5、黑暗條件下抽真空30min。6、連續(xù)酶解，室溫下23℃黑暗中靜止酶解3h7、利用光學(xué)顯微鏡檢查原生質(zhì)體（30-50μm大小）8、在過濾前加入等量的W5溶液9、洗干凈濾網(wǎng)，并用W5...

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HEK293培養(yǎng)基選購指南

嘿，小伙伴，HEK293細(xì)胞咋養(yǎng)啊？用啥培養(yǎng)基呀？哈哈，這個(gè)簡單，毋庸置疑地告訴你，DMEM和RPMI都行??！HEK293細(xì)胞是廣泛應(yīng)用于科研領(lǐng)域的一種細(xì)胞模型，當(dāng)然要注意選用適合它們的培養(yǎng)基啦。妥妥地，你得選擇營養(yǎng)豐富、含有充足生長因子和營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基啊。DMEM和RPMI這兩個(gè)培養(yǎng)基都含有足夠的碳水化合物、氨基酸和維生素，供給細(xì)胞所需的能量和材料，保證細(xì)胞生長和繁殖。這兩種培養(yǎng)基各有千秋??！DMEM培養(yǎng)基一般用于腫瘤細(xì)胞和無血清培養(yǎng)；而RPMI培養(yǎng)基則多用在白血細(xì)胞培養(yǎng)...

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MRC-5細(xì)胞培養(yǎng)基的選擇

MRC-5細(xì)胞是一種常用的人類胚肺細(xì)胞，是由1966年從一個(gè)正常的男性胎兒的肺部組織獲得，具有良好的細(xì)胞生長和增殖特性，可廣泛應(yīng)用于細(xì)胞培養(yǎng)、病毒研究和毒性測試等領(lǐng)域。在MRC-5細(xì)胞的培養(yǎng)中，使用的培養(yǎng)基非常關(guān)鍵，不同的培養(yǎng)基可會(huì)影響到細(xì)胞的生長和增殖特性。MRC-5細(xì)胞培養(yǎng)基必須包含合適的營養(yǎng)物質(zhì)，能量來源和生長因子以確保它們能夠健康地生長和增殖。MRC-5細(xì)胞的培養(yǎng)基主要包括基礎(chǔ)培養(yǎng)基、補(bǔ)充物以及抗生素。[1640培養(yǎng)基]其中常使用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基是DMEM/F12（Dul...

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